免费无码又爽又黄又刺激网站 ,成人丁香,女人高潮内射99精品

• 央行3820億元逆回購2025-06-01 20:58
• 中學拖欠老師加班費2025-06-01 20:59
• 吳艷妮100米欄晉級2025-06-01 21:03
• 挖鼻孔滿臉腫脹變形2025-06-01 21:10
• 海口禁止共享電單車2025-06-01 20:47
• 男演員性侵15歲少女2025-06-01 20:59
• 小米首款SUV亮相2025-06-01 21:07
• 裸男持刀闖古茗門店2025-06-01 21:05
• 高中讓家長陪餐監(jiān)考2025-06-01 21:04
• 舉報同學被打成輕傷2025-06-01 20:50
• 船只在印度海域沉沒2025-06-01 20:56
• 劉若英新劇被指抄襲2025-06-01 20:50
• 針筒玩具可刺穿西瓜2025-06-01 20:54
• 在外務工老宅被拆2025-06-01 21:13
• 拔智齒后坐飛機爆血2025-06-01 21:04
• 哈佛校長嘲諷特朗普2025-06-01 20:54
• 小米首款SUV亮相2025-06-01 21:04
• 妻子智力倒退回3歲2025-06-01 21:11
• 誰把屈原包粽子里了2025-06-01 21:04
• 偽造車禍殺妻被識破2025-06-01 20:47
• 照顧大爺生意反被騙2025-06-01 20:54
• 358家5A景區(qū)全名單2025-06-01 21:12
• 曝華為開發(fā)折疊平板2025-06-01 21:06
• 美停止發(fā)放學生簽證2025-06-01 20:49
• 20多萬的車14萬賣2025-06-01 20:52
• 情侶穩(wěn)定會一起變胖2025-06-01 20:54
• 河南鶴壁現千佛石窟2025-06-01 21:00
• 中學安保虐殺流浪狗2025-06-01 21:06
• 巴勒斯坦世衛(wèi)升國旗2025-06-01 21:01
• 美吊銷中國學生簽證2025-06-01 21:01
• 拍800斤貴妃同款荔枝2025-06-01 21:03
• 連愛馬仕也漲不動了2025-06-01 21:13
• 小麥3畝地僅收300斤2025-06-01 20:50
• 男子蹊蹺失蹤兩個月2025-06-01 21:07
• 偽造車禍殺妻被識破2025-06-01 21:01
• 懷孕吃冷藏食品流產2025-06-01 20:46
• 宜賓發(fā)生3.8級地震2025-06-01 20:52
• 針筒玩具可刺穿西瓜2025-06-01 21:09
• iOS19全面革新設計2025-06-01 20:49
• 瘦了35斤的面部變化2025-06-01 20:54
• 中國小孩不能再胖了2025-06-01 20:48
• 衛(wèi)生巾藏2003粒鉆石2025-06-01 20:52
• 巴勒斯坦世衛(wèi)升國旗2025-06-01 20:49
• 金飾價格跌回千元內2025-06-01 21:02
• 演員隋永清去世2025-06-01 20:46
• 保安偷走1億元玉石2025-06-01 21:15
• 王學勤任云南副省長2025-06-01 21:02
• 印度7名輪奸犯出獄2025-06-01 20:55
• 免簽朋友圈再增5國2025-06-01 21:07
• 溶洞垃圾已清3000斤2025-06-01 20:45
• 哈佛大學回應2025-06-01 20:47
• 于東來想脫離胖東來2025-06-01 21:10
• 為什么總因小事生氣2025-06-01 21:03
• 榴蓮價格暴跌50%2025-06-01 20:54
• 在澳門亂過馬路被撞2025-06-01 20:46
• 下班高峰持刀傷17人2025-06-01 21:13
• 張文宏團隊最新成果2025-06-01 21:15
• 美國接受卡塔爾贈機2025-06-01 21:06
• 俞灝明王曉晨結婚2025-06-01 21:02
• 鳳凰古城百人搶鴨子2025-06-01 21:09
• 孫穎莎世乒賽開門紅2025-06-01 21:12
• 零跑董事長辟謠去世2025-06-01 21:00
• 馬斯克7x24工作狀態(tài)2025-06-01 20:52
• 高考10天倒計時2025-06-01 20:54
• 張一山生日收兩巴掌2025-06-01 20:50
• 汶川3.3級地震2025-06-01 21:04
• 哪吒2第4次延長上映2025-06-01 21:01
• 景區(qū)女游客高反去世2025-06-01 21:09
• 世衛(wèi)大會拒涉臺提案2025-06-01 21:02
• 高考報名1335萬人2025-06-01 20:59
• 鹿晗演唱會審批通過2025-06-01 21:05
• 夜校開寫作課秒搶光2025-06-01 21:06
• 雇3名轎夫抬轎下山2025-06-01 20:53
• 中國夫婦在澳遭毆打2025-06-01 21:14
• 投資400萬4年未獲批2025-06-01 20:48
• 法學家夏吟蘭逝世2025-06-01 21:01
• 山洪災害致4人死亡2025-06-01 21:08
• 游客撿一百多斤蝦蟹2025-06-01 21:08
• 戀愛后莫名口臭胃痛2025-06-01 21:13
• 唐雪芳被罷免2025-06-01 20:55

購物車（⁰）

批量搜索

推薦產品

RECOMMENDED PRODUCTS

DK-MG人膠質母細胞瘤細胞

產品編號：A07X1788 規(guī)格：1×10^6

加入購物車

MIN6 小鼠胰島瘤細胞

產品編號：A07X1787 規(guī)格：1×106cells/T25

加入購物車

人琥珀酰輔酶A（SCoA）ELISA試劑盒

產品編號：A128790 規(guī)格：96T

加入購物車

莫氏立克次體核酸檢測試劑盒(熒光 PCR 法)

產品編號：AP4060 規(guī)格：50T

加入購物車

植物可溶性鈣濃度測試盒（比色法）

產品編號：AS6321283 規(guī)格：100管/96樣

加入購物車

• ELISA試劑盒
• 抗體、蛋白與多肽
• 細胞生物學
• 生化試劑盒
• RT-PCR試劑盒

關于我們

專注品質、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務

上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)是一家領先的化學、生化和材料科學等領域的科研用研發(fā)產品的制造商和供應商， 我們的產品在相當寬的基礎科學領域得到廣泛的應用。客戶包括學術界、工業(yè)界和政府的研究和開發(fā)實驗室以及制藥，生物技術，化工/石化行業(yè)等具商業(yè)規(guī)模的企業(yè)。

查看更多

×

新聞資訊

NEWS AND INFORMATION

• 公司動態(tài)
• 技術專題
• 活動資訊

2025年撫生生物春節(jié)放假通知

發(fā)布時間：2025-01-24

細胞傳代培養(yǎng)實驗步驟事項

實驗原理：
將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養(yǎng)。
細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養(yǎng)）。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。

實驗儀器：
培養(yǎng)箱（調整至37℃）、培養(yǎng)瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術器械、血球計數板、離心機、水浴箱（37℃）。

實驗試劑：
1640培養(yǎng)基或DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清、0.25%胰酶、Hank′s液、碘酒、75%酒精

實驗步驟：
一、原代細胞培養(yǎng)步驟
1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。
3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的混合液中30-60分鐘。
4、剪切：用眼科剪把組織切成2-3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30-50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角燒瓶中，結扎瓶口或塞以膠塞。
5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。
8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

二、原代組織塊培養(yǎng)法
1、剪切：把組織小塊置于小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污，吸靜Hanks液，用眼科剪反復剪切1mm塊為止。
2、擺布：用彎頭吸管吸取若干小塊，置于培養(yǎng)瓶中，用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養(yǎng)瓶底部，小塊相互距離以0.5cm為宜，每一25ml培養(yǎng)瓶底可擺布20-30塊。
3、輕輕翻轉培養(yǎng)瓶，另瓶底向上，注意翻瓶時勿另組織小塊流動，塞好瓶塞，置37℃溫箱培養(yǎng)2小時左右（勿超過4小時），使小塊微干涸。
4、培養(yǎng)：從微箱中取出培養(yǎng)瓶，開塞，46度斜持培養(yǎng)瓶，箱瓶底腳部輕輕注入培養(yǎng)液少許，然后緩緩再把培養(yǎng)瓶翻轉過來，讓培養(yǎng)液慢慢覆蓋附于瓶地上的組織小塊。置溫箱中靜止培養(yǎng)。待細胞從組織塊游出數量增多后。再補加培養(yǎng)液。

三、貼壁細胞傳代的操作步驟：
1、吸除培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液。
2、向瓶內加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。
3、置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現細胞質回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。
4、吸除消化液，向瓶內注入Hanks液數毫升，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。
5、用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。
6、計數板計數后，把細胞懸液分成等份分裝入數個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。

四、懸浮型細胞傳代
1、吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。
2、吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

注意事項:
1、操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。
2、點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。
3、操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。
4、不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。
5、瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。
6、 吸溶液的吸管等不能混用。

發(fā)布時間：2024-11-18

微生物培養(yǎng)基配置步驟

發(fā)布時間：2024-09-26

ELISA（酶聯免疫吸附測定）具體操作步驟

 

ELISA（酶聯免疫吸附測定）包被細胞樣本通常涉及細胞培養(yǎng)上清或細胞裂解液的處理，以檢測細胞分泌的蛋白質或胞內蛋白。

發(fā)布時間：2025-05-30

PCR實驗輔料PCR管性能檢測指南

發(fā)布時間：2025-05-28

原代細胞和傳代細胞有哪些方面區(qū)別？

發(fā)布時間：2025-05-26

中國七夕節(jié)，為中國節(jié)吶喊

活動時間：8月3日-8月5日

本活動權限終端客戶

發(fā)布時間：2024-01-25

參考文獻

LITERATURE

BIOPHARMACEUTICS & DRUG DISPOSITION

Aquaculture Reports

Journal of Pharmaceutical Analysis

ENVIRONMENTAL POLLUTION

Nature Biomedical Engineering

ADVANCED FUNCTIONAL MATERIALS